Le yaourt est le produit d’une fermentation bactérienne du lait. Ici on se propose de fournir à la bactérie Lactobacillus bulgaricus l’information génétique nécessaire pour qu’elle puisse fabriquer un certain type de protéines dites « fluorescentes ». Le résultat de la manipulation devrait être l’obtention d’une nouvelle souche bactérienne permettant la fabrication de yaourt fluorescent !! :-) D’un seul coup manger du yogourt est beaucoup plus fun, puisqu’il brillera sous une lumière violette :-) !
Isoler les bactéries du yaourt
Il nous séparer les 2 espèces de bactéries qu’on trouve au sein du yaourt (j’ai pris un yaourt bulgare), Lactobacillus delbrueckii sp. bulgaricus et Streptococcus thermophilus. Pour ça j’étale une solution diluée de yaourt sur une boite de pétri contenant un milieu nutritif (ici du LB, j’avais que ça). Apres 24h de croissance à 37°C, on trouve une multitude de colonies bactériennes circulaires. En microbiologie on accepte généralement qu’une colonie n’a qu’une seule bactérie comme ancêtre, autrement dit les bactéries au sein d’une colonie donnée sont toutes les mêmes, on dit alors qu’elles sont des « clones ». Lactobacillus et Streptococcus n’ont pas la même forme d’enveloppe cellulaire, Lactobacillus est une bacille et possède un corps en forme de bâtonnet, et Streptococcus est un cocci et possède un corps sphérique (voir images). Pour savoir de qu’elle type de bactéries les colonies étaient formées, j’ai prélever une partie de ces colonie et les ai mis sur lame de verre afin de pouvoir les observer facilement sous un microscope.
Resultats - 2.3.11
Edit - 10.3.11
La proteine fluorescente
Je vais utiliser un plasmide à faible nombre de copie (afin de ne pas déstabiliser outre-mesure notre hôte) possédant le gène de la « Green Fluorescent Protein » (GFP). Il sera exprimer via un promoteur non-régulable dit « constitutif », afin de garantir le niveau d’expression de notre gène. (Je mettrai la carte du plasmide plus tard).
La suite arrive…
Thomas décembre 5, 2011
J’ai un peu de mal à comprendre la partie sur la protéine fluorescente, quelqu’un pourrait-il m’expliquer, svp?